PE-40 Avaliação da influência da composição do meio de cultura na detecção de Mycobacterium tuberculosis diferencialmente cultivável

Resumo

Introdução: A cultura bacteriana é o método padrão-ouro para o diagnóstico da tuberculose, porém apresenta limitações na recuperação de populações de Mycobacterium tuberculosis diferencialmente cultiváveis (DCMTB), que podem estar associadas à persistência da infecção e às falhas terapêuticas. Este estudo teve como objetivo avaliar a influência da composição de diferentes meios de cultura líquidos na recuperação de M. tuberculosis diferencialmente cultivável em amostras clínicas de pacientes com tuberculose pulmonar, comparando os meios Middlebrook 7H9 e Mycobacteria Growth Indicator Tube (MGIT), com e sem suplementação com filtrado de cultura. Material e Método: Trata-se de um estudo experimental realizado no Laboratório de Micobacteriologia do Núcleo de Doenças Infecciosas da Universidade Federal do Espírito Santo (UFES). Foram analisadas 10 amostras de escarro espontâneo de pacientes com tuberculose pulmonar, liberadas para descarte. Foram incluídas amostras com volume mínimo de 2 mL, provenientes de pacientes com tuberculose, e excluídas aquelas de pacientes previamente tratados para tuberculose ou coletadas há mais de sete dias. Após descontaminação pelo método NALC-NaOH, as amostras foram submetidas ao método do Número Mais Provável (NMP), comparando-se os meios Middlebrook 7H9 e Mycobacteria Growth Indicator Tube (MGIT), ambos com e sem suplementação por filtrado de cultura contendo fatores promotores de ressuscitação. O crescimento foi monitorado por até oito semanas e confirmado por plaqueamento em meio Middlebrook 7H11. A análise estatística foi realizada pelo teste de Wilcoxon pareado (pairwise), considerando-se nível de significância de 5% (p < 0,05). O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa (CAAE nº 7.831.044). Resultados: A comparação entre os meios de cultura, realizada pelo teste de Wilcoxon para amostras pareadas, demonstrou que o meio Middlebrook 7H9 não suplementado apresentou desempenho significativamente inferior ao MGIT (p<0,05). Em contraste, o 7H9 suplementado com filtrado de cultura (FC) apresentou desempenho semelhante ao MGIT, sem diferença estatisticamente significativa. Discussão : Os resultados sugerem que a suplementação com FC favorece a recuperação de Mycobacterium tuberculosis diferencialmente cultivável, aproximando o desempenho do meio 7H9 ao observado no sistema MGIT. Esse achado reforça a influência da composição do meio de cultura na recuperação bacteriana e destaca o potencial do FC como estratégia para otimizar métodos de cultivo. Embora a contaminação de algumas amostras tenha constituído uma limitação do estudo, ela não comprometeu a realização das análises nem a obtenção de resultados consistentes entre os meios avaliados. Conclusão: A investigação da influência da composição do meio de cultura sobre a recuperação de Mycobacterium tuberculosis diferencialmente cultivável poderá contribuir para o aprimoramento do diagnóstico da tuberculose, favorecendo a detecção de subpopulações bacterianas não identificadas pelos métodos convencionais. Além disso, os achados contribuem para o aprimoramento das metodologias de cultivo e podem subsidiar futuras investigações sobre estratégias para aumentar a recuperação de populações diferencialmente cultiváveis de Mycobacterium tuberculosis.